百螢小課堂又給大家分享知識啦！今天給大家講解的內容是關于細胞信號傳導。

    在生物學中，細胞信號傳導是控制基本和復雜細胞過程的通信網絡。根據信號的性質，它可以分為生物化學信號或機械信號。生化信號由蛋白質、脂質、離子等生化分子產生。對這些生化試劑的檢測可以揭示該特定類型信號傳導途徑的狀態。

   信號網絡的破壞通常會導致癌癥、Immunity病癥和代謝紊亂等病癥。通過了解信號通路，研究人員和臨床醫生也許能夠有效且高效的醫療病癥。AAT Bioquest提供廣泛的檢測方法，對涉及細胞信號傳導途徑的各種酶、蛋白質或小分子進行經濟有效的分析。靈敏度和重現性測量磷酸化、甲基化和乙酰化等活性。

1.二磷酸腺苷檢測

   二磷酸腺苷（ADP）是一種重要的有機分子，在細胞代謝中發揮著重要作用。它是 ATP 去磷酸化的產物，ATP 去磷酸化是活細胞中能量轉移所必需的關鍵反應，并且可以通過再磷酸化再循環回 ATP。ADP 和 ATP 的這種相互轉化主要通過 ATP 酶（例如磷酸酶、磷酸化酶和激酶）在線粒體和葉綠體中發生。ADP 儲存在血小板內的致密體中。當血小板被激活時，ADP 被釋放，與嘌呤能受體家族相互作用，從而調節細胞功能。
   PhosphoWorks? 熒光 ADP 測定提供了一種監測 ADP 形成的靈敏方法。在這種酶偶聯測定中，ADP 的形成是通過監測激酶活性（由于它們的比例關系）來測量的。

圖1.ADP 劑量反應通過 PhosphoWorks? 熒光 ADP 檢測試劑盒（貨號 21655）在實心黑色 384 孔板中使用 Gemini 熒光酶標儀（Molecular Devices）進行測量。孵育 15、30 分鐘和 1 小時即可檢測低至 0.3 μM ADP（Z' 系數 =0.65）。

表一.用于檢測ADP活性、形成或消耗的生化分析

2.三磷酸腺苷檢測

   三磷酸腺苷(ATP)是一種復雜的有機分子，參與細胞能量生成、代謝調節和細胞信號傳導。它作為主要能量存在于所有生物體中，并且在沒有活生物體的情況下會迅速降解。因此，ATP測定是一種有用的工具，可用于各種研究應用，以識別活生物體。常見應用包括細胞活力和細胞毒性、表面**的檢測、水中**的檢測、培養中的體細胞以及食品質量和污染檢測等。

   我們的PhosphoWorks發光法ATP檢測提供了一種快速、簡單的生物發光法，可用于通過ATP檢測來確定哺乳動物細胞的細胞活力、細胞毒性和增殖。

圖2.使用PhosphoWorks發光法ATP檢測試劑盒（貨號21610）在96孔板上使用NOVOstar酶標儀(BMG Labtech)檢測ATP計量反應。

表二.用于檢測ATP活性、形成或消耗的試劑

3.環磷酸腺苷檢測

   環磷酸腺苷 (cAMP) 是許多生物途徑中重要的二信使。它在許多生物體中用于細胞內信號轉導，傳遞 cAMP 依賴性途徑，并參與蛋白激酶的激活和離子通道調節。cAMP 源自 ATP，由質膜結合的腺苷酸環化酶合成，該酶與跨膜受體偶聯。腺苷酸環化酶的激活是由一系列信號分子啟動的。這些分子與GPCR等受體相互作用，啟動腺苷酸環化酶活性并增加細胞內 cAMP 水平。cAMP 激活 cAMP 依賴性蛋白激酶，負責磷酸化特定底物蛋白。cAMP 活性的測定可用于評估受體激活、受體表征和受體-配體鑒定的功能測定。

圖3.使用Screen Quest比色法ELISA cAMP檢測試劑盒(Cat#36370)在帶有SpectraMax酶標儀的透明96孔板中檢測cAMP計量反應。

表3.用于檢測G蛋白偶聯受體系統中腺苷酸環化酶活性