一.百螢 鏈霉親和素-Xtra IF488綴合物概述

鏈霉親和素綴合物廣泛用于和生物素綴合物結合以檢測多種生物靶標，例如蛋白質，核酸和其他分子。它們被用作許多生物檢測的理想選擇，例如免yi熒光顯微鏡，流式細胞術，蛋白質印跡和其他生物應用，因為鏈霉親和素具有很強的親和力結合生物素，在廣泛的pH和溫度范圍內都不會受到影響。AAT Bioquest®提供多種標記有經典熒光染料的鏈霉親和素偶聯物（例如：FITC，TRITC，TexasRed®，Cy3®，Cy5®和Cy7®），以及我們優異的水溶性，光穩定性iFluor 和mFluor 染料。然而，常規的生物素-親和素檢測系統仍然受到現有熒光綴合物有限信號強度的限制。鏈霉親和素Xtra iFluor綴合物是超亮鏈霉親和素綴合物的新家族，其激發和發射性能與Alexa Fluor熒光團幾乎相同，信號增強了3到5倍。它是在細胞成像或流式細胞儀中檢測低豐度靶標的一組強大工具。iFluor 488是FITC通道成像中常見的綠色熒光色之一。

二.百螢 鏈霉親和素-Xtra IF488綴合物參數

Ex(nm)   491

Em(nm)    516

分子量   ~52000

溶劑     Water

存儲條件   在-15℃以下保存，避光防潮

三.百螢 鏈霉親和素-Xtra IF488綴合物適用儀器

流式細胞儀   

Ex:     488nm

Em:   530/30nm

通道:   FITC通道

熒光顯微鏡

Ex:     FITC濾波片組

Em:    FITC濾波片組

通道:   黑色透明底板

四.百螢 鏈霉親和素-Xtra IF488綴合物實驗方案

溶液配制

1.儲備溶液配制

所有未使用的儲備溶液應分為一次性使用的等分試樣，并在制備后儲存在-20°C下。 避免重復凍融循環。
鏈霉親和素-Xtra 儲備溶液（1 mg / mL）：加入100 uL的Cat＃46000和1 mL的Cat＃46001的ddH2O，制成1mg/mL的儲備溶液。注意：此重組溶液在4°C儲存并避光保存后，可穩定保存6個月而無明顯變化。為了更長的存儲時間，可以將重構的溶液分成單次使用的等分試樣，或者不分裝添加等體積的甘油（濃度為50％），然后將溶液存儲在-20°C（避光）。

2.工作溶液配制

鏈霉親和素-Xtra 工作溶液：對于IF，建議的染色濃度為1-5 ug / ml。對于FACS，建議在染色濃度為0.1-0.5 ug / 100 uL /百萬細胞。注意： PBS + 0.1％BSA可用作染色緩沖液。 注意：為了獲得每種應用的性能，需要仔細確定該試劑的濃度。注意：  建議的工作稀釋度僅供參考，建議用戶在測試中使用適當的陽性和陰性對照對產品進行滴定。

樣品示例及操作

1. 按照說明書中的建議用目標抗體封閉和處理樣品。

2. 在樣品中以適當的濃度和持續時間添加生物素偶聯的二抗工作溶液。注意：請驗證您的生物素偶聯抗體與實驗中使用的一抗的相容性和類型。例如，如果一抗是小鼠抗體，則與生物素結合的山羊抗小鼠抗體可用于該測定。

3. 在室溫下用鏈霉親和素-Xtra 工作溶液孵育細胞30分鐘至1小時。 注意：  孵育的時間需要仔細確定。

4. 取出工作溶液，然后將細胞重懸在緩沖液中。

5. 使用熒光顯微鏡拍攝圖像或使用流式細胞儀記錄強度。

圖示：