產品簡介:
中文名: 細胞增殖與活性檢測試劑盒
英文名: CCK-8 Cell Counting Kit-8
產品貨號: TJ35001.TJ35002.TJ35003.TJ35004.TJ35000
供應商: AAT Bioquest
產品規格: TJ35001:5ml,TJ35002:10ml,TJ35003:30ml,TJ35004:100ml,TJ35000:1ml
產品參數
Ex (nm): -
Em (nm):-
分子量: -
溶劑: -
存儲條件:在零下15度以下保存, 避免光照
Cell Counting Kit-8(cck-8)細胞增殖與活性檢測試劑盒工作原理
Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 細胞增殖與活性檢測試劑盒是百螢生物生產的一種基于 WST-8 的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。其主要成分為水溶性四唑鹽 WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),WST-8 是一種類似于 MTT 的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜(formazan)。WST-8 被細胞內脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠直接溶解在培養基中。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺;顏色的深淺與細胞的增殖成正比,與細胞毒性成反比。使用酶標儀在450mM波長處測定OD值,間接反映活細胞數量。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供上等的熒光探針。
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CCK-8法
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MTT法
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MTS法
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SRB法
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XTT法
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WST-1法
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溶解性
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水溶
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難溶
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水溶
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水溶
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水溶
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水溶
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檢測波長
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450nm
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490nm
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450nm
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510nm
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450nm
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450nm
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外觀
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液體
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固體
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液體
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液體
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固體
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液體
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是否需要重新溶解
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不需要
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需要
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不需要
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需溶于Tris堿
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需要
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不需要
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便捷性
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+++
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++
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+++
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+
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++
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檢測效率
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++++
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+
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++
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+
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++
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可重復性
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+++
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+
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++
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++
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+
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穩定性
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+++
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+
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+
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+++
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+
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1.MTT法:MTT法又稱MTT比色法,是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臜(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。
2.MTS法:以生成有色化合物的顯色反應為基礎,比色分析對顯色反應的基本要**:反應應具有較高的靈敏度和選擇性,反應生成的有色化合物的組成恒定且較穩定,它和顯色劑的顏色差別較大。選擇適當的顯色反應和控制好適宜的反應條件,是比色分析的關鍵。
3.SRB法:磺酰羅丹明B(Sulforhodamine B,SRB)比色法,主要用來檢測細胞增殖情況。SRB是一種粉紅色陰離子染料,易溶于水,在酸性條件下可特異性地與細胞內組成蛋白質的堿性氨基酸結合;在510 nm左右波長下產生吸收峰,吸光值與細胞量成線性正相關,故可用作細胞數的定量檢測。
4.XTT法:XTT是一種與MTT類似的四唑氮衍生物,可被活細胞線粒體脫氫酶還原成水溶性的棕色甲肷產物,當XTT與電子偶合劑共同使用時,甲肷的生成量與細胞的增殖程度呈正相關。
5.WST-1法:WST-1是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的甲臜(Formazan)。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級替代產品,和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優點。
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Cell Counting Kit-8(cck-8)細胞增殖與活性檢測試劑盒活力計算
活力計算:
細胞活力*(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(0加藥)-A(空白)] ×100
A(加藥):具有細胞、CCK8溶液和**溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培養基和CCK8溶液而沒有細胞的孔的吸光度
A(0加藥):具有細胞、CCK8溶液而沒有**溶液的孔的吸光度
*細胞活力:細胞增殖活力或細胞毒性活力
CCK-8實驗中的關鍵點(供參考):
1. 種板數;
2. 2.種板后細胞的貼壁生長時間;
3. 3.加藥后的孵育時間;
4. 4.CCK-8試劑加入量;
5. 5.CCK-8試劑加入后細胞孵育時間
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