細胞活性的檢測通常與細胞健康以及細胞群成功存活并正常運作的能力相聯系,檢測細胞的活性是每個細胞實驗前期的重要工作之一。今天百螢為大家推薦四種實用性很強的用于細胞活性檢測的方法。1.染色排除法;2.還原性染料檢測法;3.熒光酯酶底物檢測法;4.線粒體膜電位檢測法。
檢測細胞活力的方法
染色排除法
使用不滲透細胞的染料區分活細胞和死細胞。由于死細胞膜破裂,染料流入細胞并被染色,而活細胞則不染色。臺盼藍或其他不滲透細胞的DNA結合染料是這中方法中的*常用染料。
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Live或Dead 可固定死細胞染料
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細胞核DCS1死細胞染料
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臺盼藍染料
還原性染料檢測法
氧化還原活力是與細胞代謝/種群存活細胞相關聯的。使用發光/熒光指示劑,WST-8和刃天青,以監測細胞的代謝活性。WST-8和刃天青的低細胞毒性便于需要更長孵育時間的測定。
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Cell Meter 比色法WST-8細胞定量試劑盒
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WST-8檢測試劑
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刃天青鈉鹽
熒光酯酶底物檢測法
細胞滲透型酯酶底物通過測量細胞酶活性和膜完整性來確定細胞活性。在擴散到活細胞中后,細胞內酯酶將所述底物水解成熒光化合物,該熒光化合物能夠保留在細胞內一段時間,產生的信號強度與活細胞數量成正比。可以使用熒光儀器監測。
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Cell Meter 細胞活性檢測試劑盒
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Cell Meter 細胞活性檢測試劑盒(活細胞/死細胞)
線粒體膜電位檢測法
線粒體膜電位(ΔΨm)的喪失是細胞凋亡的早期特征,可以使用膜電位探針間接檢測細胞活性。這些陽離子探針易于通過Δm隔離并染色活性線粒體,以鑒定活細胞。
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JC-1
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JC-10(JC-1的升級產品)
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TMRM和TMRE
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羅丹明123
表1.評估細胞活性和細胞毒性的常用參數和方法
檢測類型
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方法
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試劑實例
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細胞膜完整性
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使用死細胞染料檢測膜的完整性。膜受損的死細胞容易吸收這些染料并被染色。
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細胞核 DCS1染料
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碘化丙啶PI
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臺盼藍及其衍生物
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細胞內酶活性
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將染料加入活細胞中,通過檢測細胞內酶活性來檢測細胞活性
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鈣黃綠素 藍,AM
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鈣黃綠素 綠,AM
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鈣紫藍素450
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線粒體膜電位(ΔΨm)
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使用可透過ΔΨm并累積在線粒體中的細胞滲透性染料來鑒定活細胞。
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細胞代謝
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使用不滲透細胞的四唑鹽監測細胞的代謝活性
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WST-8檢測試劑
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Cell Meter 比色法WST-8細胞定量試劑盒
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檢測整個細胞群體的細胞氧化還原電位
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使用生物發光檢測來測量ATP和ADP。ADP / ATP比值的變化可用于區分細胞死亡和生存能力。
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PhosphoWorks 比色ATP分析試劑盒
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D-熒光素
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熒光素酶
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