1.丙磺舒（probenecid）被報道會影響鈣離子通道，比如干擾環核苷酸門控通道，有沒有可以不用該試劑的鈣離子探針？

回答：

丙磺舒（probenecid），是一種陽離子轉運體抑制劑，用來降低探針進入胞內后被排除的幾率，以提高胞內信號。常見的Fluo-3 、fluo-4、 Fluo-8都需要丙磺舒，否則信號會很低。您可以選擇Calbryte系列，該系列無需丙磺舒（probenecid）仍會有很好的信號，降低干擾，是不含丙磺舒（probenecid）產品的*佳選擇。

圖示：在存在丙磺舒（左）和不存在（右）的情況下進行Ca²⁺檢測測定，并使用Ex / Em = 540/590的FlexStation3測量了截止波長為570 nm的響應。

2.沒有動態讀數功能或者沒有自加樣功能的酶標儀還能做鈣流檢測嗎？

回答：

可以。鈣流檢測的儀器常見的有FlexStation, FLIPR等，可以連續讀數并帶有自加樣系統，這樣就可以在秒的時間范圍內捕捉到更完整的鈣離子濃度變化。但如果實驗室實在用不到這樣的機器，可以考慮Cell Meter 鈣檢測免洗和免丙磺舒檢測試劑盒 (Cat# 36312)，使用普通的底讀酶標儀就可以了。該試劑盒使用了Fluo-8E AM探針，一旦與鈣離子結合，信號增>100倍，能夠使信號維持1-2min左右，給我們自己手動加樣爭取時間。

3.流式檢測鈣離子因為要取下管子加刺激劑，容易錯過*高峰，有沒有辦法？

回答：

我們有流式檢測鈣離子試劑盒，Cat#36310，Cell Meter 鈣測定流式細胞分析試劑盒，也可以選擇Fluo-8H AM探針，因Kd比較小，可以使信號保留的時間久一些。

4.有檢測植物細胞的鈣離子探針嗎？

回答：

有的。常用的 Fluo-4 AM, Fluo-8 AM 以及 Calbryte 520 AM, 都適用于植物細胞，Fluo-4*常用，若要獲得更好的信噪比，推薦其升級版本 Calbryte 520 AM。

5.內質網（ER）或者線粒體內的鈣離子濃度變化，分別使用什么探針？

回答：

ER鈣離子檢測可使用Kd 較高的Rhod-5N, AM (Cat# 21070). 線粒體鈣離子檢測可使用 Rhod-2 AM (Cat# 21064)。Rhod-2 在低濃度時特異識別線粒體。

6.血液等體液的里的鈣離子濃度用什么檢測方法？

回答：

人體血液里鈣離子的濃度大約在19 -10.5 mg/dL范圍內。血液里鈣離子濃度過低或者過高可引起低鈣血癥和高鈣血癥 。 Amplite 熒光法鈣離子定量試劑盒（Cat#36360）可用于定量體液的鈣離子濃度，可使用96孔或者384孔板經酶標儀獨取數值。不需樣本分離直接檢測，30min可完成，*低檢測0.03mM的鈣離子。

7.熒光探針的AM、Dextran葡聚糖形式有什么區別？

回答：

AM 形式通過孵育即可進入細胞內，簡便。若檢測孵育時間久容易發生區室化，比如鉆進了內質網等亞器官內。 Dextran*大的優勢就是降低了區室化作用，但是需要介入方式進入細胞內，比如microinject等。

8.我們需要高通量檢測，選擇什么產品？

回答：下列產品免洗，無需去除培養基，加入染料孵育，直接加刺激劑即可檢測。適用于高通量。