Cell Meter 活細胞免洗胱天蛋白酶3/7成像試劑盒使用我們近期開發的可滲透細胞的熒光胱天蛋白酶底物ApoSight Green Caspase 3/7（熒光探針）直接檢測活細胞中的胱天蛋白酶活性。 ApoSight Green Caspase 3/7底物由三個部分組成，包括a）熒光團，b）半胱天冬酶選擇性肽片段（DEVD），以及c）細胞穿透部分。細胞穿透部分將探針帶入活細胞。進入活細胞后，半胱天冬酶選擇性肽片段被半胱天冬酶裂解以釋放熒光團?；謴偷臒晒鈴姸扰c要測量的胱天蛋白酶的活性直接相關。與活細胞中現有的半胱天冬酶測定相比，ApoSight Green Caspase 3/7底物更加穩定，方便和準確。 ApoSight 綠色胱天蛋白酶3/7底物釋放出Ex / Em?490/520 nm的熒光團。如NucView試劑所報道的，它不需要DNA相互作用即可發熒光。如FMK肽探針所報道的，它不抑制胱天蛋白酶活性。盡管胱天蛋白酶的熒光FMK肽抑制劑被廣泛用于檢測活細胞中的胱天蛋白酶活性，但是該技術有一些嚴重的局限性：a）FMK半胱天冬酶抑制劑具有很高的細胞毒性，因為FMK肽與活性胱天蛋白酶共價結合。 b）FMK肽與caspase的不可逆共價結合會抑制caspase活性，導致假陽性凋亡。 C）FMK分析具有極高的本底，并且需要大量洗滌，從而導致低的通量。 d）FMK肽在水溶液中不穩定，必須立即使用。 Cell Meter 活細胞免洗Caspase 3/7成像試劑盒提供了優化的熒光成像測定法，用于檢測caspase3 / 7活性。該檢測可以使用96孔或384孔板進行實驗，并易于適應自動化。