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西安百螢生物科技有限公司 主營:百螢生物圍繞熒光發光、熒光標記、熒光探針等技術進行產品研發,公司產品廣泛用于核酸蛋白定量、細胞凋亡研究、細胞信號通路研究、細胞及線粒體膜電位檢測、細胞器染色、活體示蹤、抗體標記等科研領域。
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技術文章

百螢課堂:如何確定熒光分子的亮度?

今天百螢為大家介紹一個非常實用的小技巧,用于確定熒光分子的亮度。如果你想選購一種熒光探針,而你已經確切的了解到了幾種探針均可以滿足你的實驗要求,但是,哪一個才是熒光強度好的呢?求人不如求己,實驗還得靠自己!今天小螢告訴你之后,請收藏好它!


熒光分子的亮度取決于兩個因素:

1. 消光系數(ε):熒光分子吸收特定波長的光的強度。

2. 熒光量子產率(Φ):吸收光轉換為發射光的效率。

有小伙伴要問了,知道了消光系數和熒光量子產率又該怎么辦呢?請記住以下公式:

亮度=消光系數(ε) x 熒光量子產率(Φ)

實例驗證:大家對于PE、APC、Cy5應該都是比較熟悉的。

· PE = 1,960,000 cm-1M-1 (ε)x 0.84(Φ) = 1646400

· APC = 700,000 cm-1M-1 (ε)x 0.68 (Φ)= 476000

· Cy5 = 250,000 cm-1M-1 (ε)x 0.20 (Φ)= 50000

現在相信大家不用我說,也能看出哪個更亮了吧!那有小伙伴又要問了,可是熒光探針那么多,我找不到確切的消光系數和熒光量子產量??!別著急,下面是我們為您總結好的常用的產品消光系數和熒光量子產率請收好!

產品名稱

消光系數(ε)cm-1M-1

熒光量子產率(Φ)

備注

iFluor 350

20000

0.95

在水性緩沖液中(pH=7.2)

iFluor 405

37000

0.91

iFluor 430

40000

0.78

iFluor 450

40000

0.82

iFluor 488

75000

0.9

iFluor 514

80000

0.83

iFluor 532

90000

0.68

iFluor 546

100000

0.67

iFluor 555

100000

0.64

iFluor 560

120000

0.57

iFluor 568

100000

0.57

iFluor 594

180000

0.53

iFluor 610

110000

0.85

iFluor 633

250000

0.29

iFluor 647

250000

0.25

iFluor 660

250000

0.26

iFluor 670

250000

0.63

iFluor 680

220000

0.23

iFluor 700

220000

0.23

iFluor 750

275000

0.12

iFluor 790

250000

0.13

iFluor 800

250000

0.11

iFluor 810

250000

0.05

iFluor 820

250000

N/D

iFluor 840

200000

0.02

PBS中

 

產品名稱

消光系數(ε)cm-1M-1

熒光量子產率(Φ)

備注

Alexa Fluor 488

73000

0.92

緩沖液(pH=7.2)

Alexa Fluor 532

81000

0.61

Alexa Fluor 546

112000

0.1

Alexa Fluor 568

88000

0.69

Alexa Fluor 594

92000

0.66

Alexa Fluor 647

270000

0.33

Alexa Fluor 660

132000

0.37

Alexa Fluor 680

183000

0.36

Alexa Fluor 700

205000

0.25

Alexa Fluor 750

290000

0.12

 

產品名稱

消光系數(ε)cm-1M-1

熒光量子產率(Φ)

備注

Cy3

150000

0.04

 

Cy3B

120000

0.58

 

Cy3B酸

120000

0.58

 

Cy5

250000

0.27(PBS)/0.4(乙醇)

 

Fluo-4

82000

0.16

 

Fluo-8

23430

0.16

 

Cal-590

78000

0.62

 

7-AAD

27500

0.02

在雙鏈DNA結合的情況下

AFC

17000

0.53

在乙醇中

Hoechst 33258

46000

0.034

 

SYTO 17

88000

0.964

 

SYTOX綠色

67000

0.53

DNA中

JOJO-1

171000

 0.44

DNA中


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