一、細胞代謝概述
細胞代謝的特征是細胞內發生變化的總和,通過這些變化,能量與成分被用于各種生化過程。細胞呼吸是細胞新陳代謝的一種功能,它分解糖和其他單糖,并通過化學方式利用產生的ATP來產生能量。
細胞呼吸主要涉及三個步驟:糖酵解、檸檬酸循環和氧化磷酸化。這些過程共同形成各種構建快,用于創建許多必須分子,包括蛋白質、脂質、核酸和碳水化合物。廢物的處理是細胞新陳代謝的一項重要功能,可以功能性地排泄潛在有毒成分,包括含氮化合物、磷酸鹽和硫酸鹽。由于細胞代謝與許多已知的生物途徑(氨基酸代謝和運輸、尿素循環、碳水化合物耐受性、糖原儲存、脂肪酸氧化和線粒體活性等)相關,因此了解其在細胞生理學中的作用的重要性、病癥病理學和病因學不應被低估。
圖1.TCA循環及其在脂質代謝中的作用概述。
二、方法與分析
常見的檢測和評估細胞代謝活動的技術之一是通過比色法或熒光法測定。這些測定針對已知相關途徑的特定分析物,例如在鑒定糖酵解途徑時可以選擇檢測葡萄糖、己糖激酶、丙酮酸、丙酮酸激酶,乳酸和糖原。在脂肪酸代謝中,甘油三酯、游離脂肪酸和焦磷酸鹽可能是靶標。此外,在觀察尿素代謝時可以選擇尿素、谷氨酸或L-精氨酸,并且ATP,NAD,NADH,NADP或NADPH(或其組合)可以針對總體代謝活性。這些檢測方法可以作為試劑盒在市場上買到,雖然每種方法的技術規格略有不同,但是每種方法的許多步驟是相似的。
表一.用于測量ATP活性、形成或消耗的生化測定。
表二.NAD/NADH和NADP/NADPH檢測比較