今天百螢生物為您介紹D-熒光素使用中的常見問題

1、D-熒光素適合做哪些實驗? 

D-熒光素鉀鹽和5-氟-熒光素，作為Luciferase的作用底物，常用于以下實驗：

1. 報告基因分析

2. In vivo imaging (動物活體成像)

3. In vitro imaging (細胞體外分析)

4. ATP測定

5. 其它luciferase及其基因相關的分析和研究工作

2、D-熒光素應用于活體成像的基本原理 

細胞中D-熒光素酶參與的化學發光反應遵守酶促反應的基本原理，在底物D-熒光素鉀過量的情況下，反應產生的光子數（發光量）與細胞中的D-熒光素酶的量成正相關，從而可以推算出細胞的數量。 

3、D-熒光素鉀鹽溶液的穩定性 

D-熒光素鉀鹽易溶于水和緩沖液，溶解度可高達25mg/mL。一般使用濃度為3-15 mg/mL。

溶液的pH值、溶液中的氧氣和保存時間對其保存過程中的穩定性非常重要。當溶液的pH<6.5（發生水解作用）或>7.5（發生消旋化作用，D型轉化為L型）的情況下，D-熒光素鉀鹽相對不穩定。如果溶液中存在少量的氧氣，將加速D-熒光素鉀的降解速度。

D-熒光素配成溶液后，在佳的保存條件（-80°C，佳pH，無氧氣）下，存在固定的降解速度：0.2%/天，因此配成溶液保存的D-熒光素應盡量在1年內使用完。

有水存在的情況下，主要發生消旋化作用，即D-熒光素轉化成L-熒光素，有報道稱L-熒光素對熒光素酶催化的酶促反應有抑制作用。

4、D-熒光素、D-熒光素鈉和D-熒光素鉀之間的區別 

主要區別在于溶解和分散性能。D-熒光素鉀鹽在水和緩沖液中的溶解度高，且溶解速度較快，故在一般的生物學試驗中常用D-熒光素鉀鹽。 

5、D-熒光素鉀鹽的保存和運輸條件  

保存條件：≤-20°C，避光，保持干燥。（在不打開包裝的條件下，可保存兩年時間）。

運輸條件：高純度的D-熒光素鉀鹽可在短時間內常溫條件下保存，運輸條件為常溫。

原裝（沒有打開包裝）熒光素的包裝瓶中充有氬氣，保證其穩定性，打開包裝后，請嚴格按照保存條件保存。

D-熒光素鉀鹽具有易溶于水的特性，其暴露于空氣中，易吸潮。在稱量過程中，請考慮其易吸潮的特性，先進行溫度平衡，再快速稱取。 

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