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西安百螢生物科技有限公司 主營:百螢生物圍繞熒光發光、熒光標記、熒光探針等技術進行產品研發,公司產品廣泛用于核酸蛋白定量、細胞凋亡研究、細胞信號通路研究、細胞及線粒體膜電位檢測、細胞器染色、活體示蹤、抗體標記等科研領域。
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公司新聞

用于多種生物學應用的花青染料

可用于多種生物學應用的花青染料

今天百螢給大家帶了的是花青素及其衍生物的介紹和推薦。與其他經典熒光染料相比,花青染料的熒光信號如何?可用于哪些領域?光譜性質是怎樣的?效果良好的花青類產品都有哪些?能修飾哪些反應基團?感興趣的朋友一起來看看吧!


熒光素及其衍生物

“花青”這個名詞是來自于聚次甲基組合成染料家族中的,它是一個非系統名稱,cyanin一詞源自英語單詞“ cyan”,通常表示藍綠色。 花青染料的摩爾消光系數(約150,000至300,000 M-1cm-1)非常大,結合適度的量子產率,使它可以產生極其明亮的熒光信號。 事實證明,花青在許多領域都非常有用,包括成像技術,生物學,激光技術和分析化學等。 AAT Bioquest提供了*多的花青染料集合,它們可用作多種生物學應用的分子探針。 對于某些生物學應用,花青可以有利地替代其他常規染料,例如熒光素和羅丹明。


花青染料Cy3和Cy5

圖1.Cy3(左),Cy5(中)和Cy7(右)染料的*大吸光度(虛線)和發射光(陰影區域)。

在花青染料中,*受歡迎的是發出黃綠色熒光(約550 nm激發,約570 nm發射)的Cy3和在紅色部分發出熒光(約650 nm激發,約670 nm發射)的Cy5。 由于它們的光譜重疊極小,通常將Cy3和Cy5結合起來進行檢測。Cy3可以通過各種熒光儀,成像儀和帶有TRITC標準濾波片的顯微鏡進行檢測。 由于其較高的摩爾消光系數,Cy3染料也很容易在電泳凝膠和溶液中用肉眼觀察。 Cy5的消光系數也非常高(在凝膠電泳中肉眼可檢測到1 nmol),并且在紅色部分具有*大的熒光發射峰,因此Cy5成為了紅色熒光染料的流行替代品。

光譜性質

產品名稱 激發光線 Ex / Em(nm) 濾波片組 消光系數(ε) 量子產率(Φ)
Cy3 532nm 554/568nm Cy3 / TRITC 150,000 0.15
Cy5 633-647nm 650/669nm Cy5 250,000 0.27
Cy7 730nm 754/778nm Cy7 250,000 0.3

磺化與非磺化花青

磺化和非磺化花青染料具有非常相似的熒光特性,在許多應用中它們可以互換使用。染料之間的差別主要在于它們的溶解度。在標記生物分子之前,非磺化花青必須溶解在有機溶劑中,如DMF或DMSO。而磺化花青可用于水性條件(帶電荷的磺酸鹽基團可減少染料和共軛物的聚集)。為了通過對水或水緩沖液的透析純化,必須使用磺化花青有效去除未反應的染料。通過凝膠過濾、色譜或電泳純化對磺化和非磺化菁都是合適的。

表2.磺化和非磺化Cy3,Cy5和Cy7染料的光譜比較。


Cy3 Cy5 Cy7
形式 磺化 非磺化 磺化 非磺化 磺化 非磺化
Ex / Em(nm) 554/568 650/669 754/778
過濾片組 Cy/ TRITC Cy5 Cy7
ε(消光系數 cm-1M-1) 150,000 140,000 250,000 230,000 250,000 250,000
Φ(熒光量子產率) 0.10 0.07 0.27 0.16 0.12 0.2
貨號 263 191 268 195 161 198

花青產品類型

我們提供多種花青產品選擇,包括用于標記生物分子,綴合物,指示劑等的活性染料和結合試劑盒。

  • 花青抗體/蛋白標記試劑盒
  • 用于細胞凋亡檢測的Annexin V綴合物
  • 串聯染料
  • DIGE花青染料
  • 花青標記的酪胺

花青反應性染料

用于修飾以下反應基團的Cy染料標記的化學試劑:

巰基 羰基 點擊化學
  • 琥珀酰亞胺酯
  • 馬來酰亞胺
  • 酰肼
  • 疊氮化物
  • 炔烴
  • 四嗪
  • 反式環辛烯

花青染料標記的熒光二抗綴合物

從多種花青標記的熒光二抗和鏈霉親和素偶聯物中選擇,用于一抗的信號放大檢測:

山羊抗小鼠IgG 山羊抗兔IgG 鏈霉親和素
  • Cy3
  • Cy5
  • Cy7
  • Cy3
  • Cy5
  • Cy7
  • APC-Cy7
  • Cy3
  • Cy5
  • Cy7
  • RPE-Cy7

百螢生物是美國AAT Bioquest中國區域代理商,為您提供AAT Bioquest*上等的產品、*詳盡的技術和*前沿的資訊,歡迎來電咨詢!

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