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西安百螢生物科技有限公司 主營:百螢生物圍繞熒光發光、熒光標記、熒光探針等技術進行產品研發,公司產品廣泛用于核酸蛋白定量、細胞凋亡研究、細胞信號通路研究、細胞及線粒體膜電位檢測、細胞器染色、活體示蹤、抗體標記等科研領域。
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公司新聞

用于GPCR和鈣離子通道功能分析的一系列鈣指示劑(二)

用于GPCR和鈣離子通道功能分析的一系列鈣指示劑(二)

上次,我們系統的介紹了AAT Bioquest的鈣離子熒光探針,今天百螢為大家具體介紹一下AAT Bioquest的鈣離子綠色熒光探針與市售的其他綠色探針的對比數據。將所有的鈣離子綠色熒光探針放在一起,它們的激發發射光線有多大差異?哪款產品的相對亮度更高?細胞內保留時間更長?細胞加載時間更短?AAT Bioquest*亮的綠色鈣離子熒光探針的性能如何?感興趣的朋友一起來看看吧!



綠色鈣離子熒光探針的比較

產品名稱 Ex/Em(nm) (信號背景比)S/B 相對亮度 細胞內保留 加載時間 其他
Fluo-3 506/526 2 50 相比*低 1 h 在相同條件下,Calbryte探針的亮度明顯更高
Fluo-4 494/516 4.5 100 1 h
Fluo-8 490/514 4.5 ~200 0.5-1 h
Cal-520 492/514 9.0 ~150 1-2 h
Calbryte-520 490/514 10.0 ~350 0.5-1 h

Calbryte-520的主要功能:

1.異常明亮
2.在細胞中比Fluo-3和Fluo-4大大提高了信噪比
3.明顯增強的細胞內保留(減少甚至消除了丙磺舒的使用)
4.更快的細胞加載

圖1.各種綠色鈣離子熒光指示劑對比圖。




Calbryte 520與市售的其他綠色鈣離子指示劑的各類數據對比

內源性Gq的鈣含量測定---Calbryte 520 vs. Fluo-4

圖2.用熒光顯微鏡ATP誘導CHO-K1細胞內源性P2Y受體反應。Calbryte 染料產生更亮的信號,更高的信噪比,并大大增強了細胞保留能力。


外源Gq的鈣含量測定---Calbryte 520 vs. Fluo-4


Calbryte 520無丙磺舒免洗試劑盒與FLIPR Calcium 4檢測試劑盒數據分析

圖3.CHO-K1細胞中內源性P2Y受體對ATP的熒光信號響應的比較。 將CHO-K1細胞以50,000個細胞/ 100 μL /孔在黑色96孔板中接種過夜。 使用Screen Quest Calbryte 520無丙磺舒和免洗的鈣測定試劑盒(紅色),FLIPR鈣4測定試劑盒(藍色)和Fluo-4直接鈣測定試劑盒(綠色)測量鈣通量響應。 FlexStation 3添加了ATP(50 μL /孔)以達到*終指示的濃度。


Calbryte 520和Fluo-4在GPCR(Gi)靶向難標記受體中的應用數據對比

圖4.Rantes在Flexstation中刺激了趨化因子受體5(CCR5)瞬時轉染的CHO細胞(Cat#38105)中的鈣反應(注:上方,深綠色線條為Calbryte 520;下方,淺綠色線條為Fluo-4)


Calbryte 520與GPCR(Gi)目標間接cAMP檢測的應用


圖5.嵌合G蛋白(Gqi,Gqo,Gqs,Gqz)或混雜G蛋白(Gα16)可以與Gi,Go或Gs蛋白偶聯受體結合,產生外源性細胞內鈣信號。

圖6.使用Calbryte-520 PBX NW試劑盒(#36318)在CHO-Ga16-NOP細胞(#38100)中測量了傷害感受肽刺激的鈣反應。




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