今天百螢給大家帶了的是經典熒光染料中香豆素的介紹及推薦。哪種香豆素產品使用范圍*廣?與其他經典熒光染料相比,香豆素有什么優勢?希望通過百螢此次的推薦,可以讓大家對香豆素有一個新的了解。
香豆素及其衍生物
香豆素和香豆素衍生物是紫外線可激發的藍色熒光染料,其短發射波長在?390至?480 nm范圍內。用途*廣泛的香豆素包括AMCA、7-氨基香豆素(AFC和AMC)、7-羥基香豆素和7-甲氧基香豆素的衍生物, 它們用于制備藍色熒光肽、蛋白質和其他生物分子。與熒光素, 羅丹明和花青相比,香豆素由于其相對較低的消光系數而產生中等亮度的熒光,光穩定性比較穩定。藍光探針*適合用于細胞靶標等高豐度靶標的直接成像、細胞追蹤應用、檢測酶活性的底物以及某些多色熒光應用-包括**熒光、核酸和蛋白質微陣列、原位雜交和神經元追蹤等。
光譜性質
激發光線:
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405 nm
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濾波器組:
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DAPI
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*大激發光:
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376nm
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*大發射光:
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480nm
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消光系數:
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75,000cm-1 M -1
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量子產率:
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0.53
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圖1: AMCA(一種常用的香豆素衍生物)的激發和發射光譜。
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AMCA和Alexa Fluor® 350的*佳替代品iFluor 350
iFluor 350染料是一種與AMCA光譜相似的亮藍色熒光染料,具有比香豆素更優良的水溶性、光穩定性以及更高的熒光量子產率。iFluor 350綴合物非常適合直接對高豐度靶標成像,在多色應用(例如流式細胞儀和超分辨率熒光顯微鏡)中特別適用,而不會影響綠色和紅色熒光探針的性能。圖2.將 HeLa細胞固定在4%甲醛中,然后用iFluor 350鬼筆環肽染色。
表1.iFluor 350與AMCA光譜比較
熒光產品
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量子產率
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消光系數
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亮度
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iFluor 350
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0.95
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20,000
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**
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AMCA
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0.53
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19,000
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*
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香豆素產品類型
我們提供多種香豆素產品,包括用于標記肽、蛋白質和其他生物分子的活性染料、綴合物、以及用于檢測細胞、勻漿和溶液中酶活性的底物。
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7-羥基-4-甲基香豆素 (4-甲基傘形酮)
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7-羥基-4-三氟甲基香豆素
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3-氰基-7-羥基香豆素
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6-氯-8-氟傘形酮 (CF-MU)
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7-氨基-4-三氟甲基香豆素(AFC)
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7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)
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2,4-二氟間,苯,二,酚
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4-氟間,苯,二,酚
香豆素活性染料
選擇一種染料標記化學試劑以修飾以下反應基團:
胺
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硫醇
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羧基,羰基和點擊化學
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琥珀酰亞胺酯
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iFluor 350
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iFluor 405
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AMCA
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DEAC
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7-羥基香豆素
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7-甲氧基香豆素
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7-羥基-4-甲基香豆素-3-乙酸
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馬來酰亞胺
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iFluor 350
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iFluor 405
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AMCA C2
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酶底物
選擇一種酶底物,以檢測酶促活性:
半胱天冬酶
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蛋白酶
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肽酶
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磷酸酶
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半胱天冬酶3
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Ac-DEVD-AFC
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Ac-DEVD-AMC
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Z-DEVD-AFC
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Z-DEVD-AMC
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半胱天冬酶8 /顆粒酶B
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Ac-IETD-AFC
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Ac-IETD-AMC
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Z-IETD-AFC
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半胱天冬酶9
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蛋白酶
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Gly-Pro-AMC
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Ala-AMC
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Ac-Pro-Ala-Leu-AMC
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MeO-Succ-Arg-Pro-Tyr-AMC
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Suc-LLVY-AMC
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纖溶酶
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α-凝血酶
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氨肽酶
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內肽酶
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氨肽酶/內肽酶
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Gly-Pro-AMC
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D-Ala-AMC
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Benzoyl-Arg-AMC
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綴合物
選擇一種香豆素綴合物進行凋亡檢測、細胞器標記:
二級抗體綴合物
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F-肌動蛋白標記
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凋亡檢測
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鬼筆環肽
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AMCA
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iFluor 350
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iFluor 405
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