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西安百螢生物科技有限公司 主營:百螢生物圍繞熒光發光、熒光標記、熒光探針等技術進行產品研發,公司產品廣泛用于核酸蛋白定量、細胞凋亡研究、細胞信號通路研究、細胞及線粒體膜電位檢測、細胞器染色、活體示蹤、抗體標記等科研領域。
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公司新聞

超級好用的紫外可激發的藍色熒光染料香豆素 怎么錯過


今天百螢給大家帶了的是經典熒光染料中香豆素的介紹及推薦。哪種香豆素產品使用范圍*廣?與其他經典熒光染料相比,香豆素有什么優勢?希望通過百螢此次的推薦,可以讓大家對香豆素有一個新的了解。



香豆素及其衍生物

香豆素和香豆素衍生物是紫外線可激發的藍色熒光染料,其短發射波長在?390至?480 nm范圍內。用途*廣泛的香豆素包括AMCA、7-氨基香豆素(AFC和AMC)、7-羥基香豆素和7-甲氧基香豆素的衍生物, 它們用于制備藍色熒光肽、蛋白質和其他生物分子。與熒光素, 羅丹明和花青相比,香豆素由于其相對較低的消光系數而產生中等亮度的熒光,光穩定性比較穩定。藍光探針*適合用于細胞靶標等高豐度靶標的直接成像、細胞追蹤應用、檢測酶活性的底物以及某些多色熒光應用-包括**熒光、核酸和蛋白質微陣列、原位雜交和神經元追蹤等。



光譜性質

激發光線:  405 nm
濾波器組: DAPI
*大激發光: 376nm
*大發射光: 480nm
消光系數: 75,000cm-1 M -1
量子產率: 0.53

圖1: AMCA(一種常用的香豆素衍生物)的激發和發射光譜。



AMCA和Alexa Fluor® 350的*佳替代品iFluor 350

iFluor 350染料是一種與AMCA光譜相似的亮藍色熒光染料,具有比香豆素更優良的水溶性、光穩定性以及更高的熒光量子產率。iFluor 350綴合物非常適合直接對高豐度靶標成像,在多色應用(例如流式細胞儀和超分辨率熒光顯微鏡)中特別適用,而不會影響綠色和紅色熒光探針的性能。圖2.將 HeLa細胞固定在4%甲醛中,然后用iFluor 350鬼筆環肽染色。


表1.iFluor 350與AMCA光譜比較

熒光產品 量子產率 消光系數 亮度
iFluor 350                            0.95                            20,000                      **                
AMCA 0.53 19,000 *


香豆素產品類型

我們提供多種香豆素產品,包括用于標記肽、蛋白質和其他生物分子的活性染料、綴合物、以及用于檢測細胞、勻漿和溶液中酶活性的底物。

  • 7-羥基-4-甲基香豆素 (4-甲基傘形酮)
  • 7-羥基-4-三氟甲基香豆素
  • 3-氰基-7-羥基香豆素
  • 6-氯-8-氟傘形酮 (CF-MU)
  • 7-氨基-4-三氟甲基香豆素(AFC)
  • 7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)
  • 2,4-二氟間,苯,二,酚
  • 4-氟間,苯,二,酚

香豆素活性染料

選擇一種染料標記化學試劑以修飾以下反應基團: 

硫醇 羧基,羰基和點擊化學
  • 琥珀酰亞胺酯
    • iFluor 350
    • iFluor 405
    • AMCA
    • DEAC
    • 7-羥基香豆素
    • 7-甲氧基香豆素
    • 7-羥基-4-甲基香豆素-3-乙酸
  • 馬來酰亞胺
    • iFluor 350
    • iFluor 405
    • AMCA C2
  • 疊氮化物
    • AMCA
  • 炔烴
    • AMCA
  • 酰肼
    • iFluor 350
    • iFluor 405
  • 乙,二,胺
    • AMCA

酶底物

選擇一種酶底物,以檢測酶促活性:

半胱天冬酶 蛋白酶 肽酶 磷酸酶
  • 半胱天冬酶3
    • Ac-DEVD-AFC
    • Ac-DEVD-AMC
    • Z-DEVD-AFC
    • Z-DEVD-AMC
  • 半胱天冬酶8 /顆粒酶B
    • Ac-IETD-AFC
    • Ac-IETD-AMC
    • Z-IETD-AFC
  • 半胱天冬酶9
    • AC-LEHD-AMC
  • 蛋白酶
    • Gly-Pro-AMC
    • Ala-AMC
    • Ac-Pro-Ala-Leu-AMC
    • MeO-Succ-Arg-Pro-Tyr-AMC
    • Suc-LLVY-AMC
  • 纖溶酶
    • D-VLK-AMC
  • α-凝血酶
    • BOC-Val-Pro-Arg-AMC
  • 氨肽酶
    • Leu-AMC
  • 內肽酶
    • Z-Gly-Pro-AMC
  • 氨肽酶/內肽酶
    • Gly-Pro-AMC
    • D-Ala-AMC
    • Benzoyl-Arg-AMC
  • 堿性磷酸酶
    • DiFMUP
  • 磷酸酶
    • MUP
    • MUP,二鈉鹽

綴合物

選擇一種香豆素綴合物進行凋亡檢測、細胞器標記:

二級抗體綴合物 F-肌動蛋白標記 凋亡檢測
  • 山羊抗小鼠IgG
    • iFluor 350
    • iFluor 405
  • 山羊抗兔IgG
    • iFluor 350
    • iFluor 405
  • 鏈霉親和素
    • iFluor 350
    • iFluor 450
  • 鬼筆環肽
    • AMCA
    • iFluor 350
    • iFluor 405
  • 膜聯蛋白V
    • iFluor 350
    • PacBlue

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