百螢對*近收到的許多客戶關于轉染實驗遇到的問題進行了總結歸納，希望可以給其他準備/正在做相關實驗的同學一點小小的幫助。

以下是轉染實驗三大問題詳細解答
1.哪種水平的DNA純度*適合轉染？

回答：
雖然DNA純度和濃度有一定范圍，但是包括所選的轉染試劑在內的幾個因素可能會影響特定的過程。
建議：

• 比較DNA /試劑濃度以獲得*佳性能。
• 在混合前檢測DNA和試劑的不同孵育時間。
• 將內**水平盡可能保持在*低。
• A260 / A280的*理想純度范圍為（1.7-1.9），首先嘗試在此范圍內進行調整。

2.如何使用流式細胞儀確定轉染效率？

回答：
使用流式細胞儀，確定特定轉染程序非常容易：
建議：

• 使用未轉染的細胞進行對照，并從實驗結果中減去基線強度數據。
• 信號強度圖是比較細胞系對不同轉染試劑反應*簡單有效的實驗輔助工具。

一般不需要太多手動分析，大多數儀器都具有自帶的FACS分析程序的軟件，可快速獲得結果。

3.轉染后我的細胞快要死了，我該怎么辦？

回答：
轉染后細胞死亡有許多可能的原因，我們建議您使用以下三種方法進行檢查：

• 在不使用試劑的情況下對DNA進行額外的監測：表達的蛋白質可能具有毒性。
• 檢查是否有污染并根據需要進行處理，或者使用新的培養液進行實驗。
• 選擇***可能太強或添加太早。請以更低的濃度和更長的間隔再次嘗試實驗。
• 以上是轉染實驗三大問題詳細解答，希望可以幫助到您