Cat#17514
羥芪巴脒*DNA和RNA染料
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訂購信息
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存儲條件
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貨號：17514
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避免暴露在光線下
保持<-15°C并干燥
到期：收到后12個月
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化學和物理特性
結構式：
分子量：472.54
外觀：黃色粉末
溶劑：水或0.9% PBS
光譜特性：
激發=360nm，發射=625nm
生物應用
Hydroxystilbamidine（也稱為Fluoro Gold）用于染色DNA和RNA。 它展出與RNA相比，當與DNA結合時，熒光發射譜具有明顯不同。 這種陽離子染料也經常用作逆行神經元示蹤劑。
染色樣品方案
Hydroxystilbamidine的使用與其他熒光示蹤劑基本相同。 主要區別在于Fluoro-Gold在注射后存活時間，濃度范圍，組織**和與其他組織化學技術的兼容性方面更靈活。 它比大多數其他熒光示蹤劑更耐褪色，更亮和更持久。
操作方法
1.染料濃度：使用1至10％羥基芪脒。 起初，建議濃度為4％。 如果在注射部位不希望發生壞死，或標記太強，則將濃度降低至2％溶液。
2.染料注入：
2.1壓力注入 - 這可能是常用的應用模式。 注射的體積范圍為0.05-1μl，通常為0.1-0.2μl。
2.2晶體 - 示蹤劑的晶體可以從微量移液管的**施用。
3.固定：盡管可以使用任何固定劑或不使用固定劑，但常使用含有4％甲醛的PBS。含有高濃度重金屬（如鋨，汞）的固定劑會熄滅熒光，而高濃度（超過1％）的戊二醛可能會增加背景熒光。
4.組織處理：含有羥基芪脒的組織可以根據常見的組織學技術進行處理。常使用固定組織的冷凍切片。
5.聯用技術在此處理時，可以進一步處理切片用于**標記，例如放射自顯影，HRP組織化學，**細胞化學，**熒光示蹤劑，熒光復染劑等。
6.切片安裝及處理：切片通常安裝在涂有明膠的載玻片上，空氣干燥，浸入二甲苯中，并用非熒光DPX塑料封固劑蓋上蓋玻片。 切片可以用分級醇脫水，除非這與**示蹤劑不相容。 如果將羥基噻嗪與熒光**細胞化學組合，則將切片風干并直接用DPX蓋上蓋玻片。
7.檢查和攝影：羥基芪脒可以使用寬帶紫外激發濾光片（激發 - 323nm，發射 - 中性pH為620nm）用熒光顯微鏡觀察。當用中性pH緩沖液處理組織時發出金色，而當用酸性（例如PH3.3）pH緩沖液處理組織時發出藍色。它可以用數碼機或膠片機拍攝（使用Ektachrome 200-400 ASA膠片進行彩色打印，使用可比較的速度膠片進行黑白打?。?。大多數曝光時間范圍為10-60秒曝光，具體取決于物鏡放大倍數和標簽強度。三十（30）秒的暴露是平均的?？梢岳枚啻伪┞秮硗瑫r顯現羥基雌二醇和另一種示蹤劑。因此，UV將與明場照明組合以同時在放射自顯影中定位具有HRP或銀顆粒的Fluoro-Gold。類似地，藍光激發可以組合以也可視化FITC的綠色發**色，而綠色激發光可以用于同時觀察碘化丙啶或溴化乙錠（熒光復染劑）的紅色發**色。
參考文獻
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