鬼筆環肽(phalloidin),是從一種劇毒磨菇(Amanita phalloides)中分離出來的一種多肽物質,屬于毒傘肽類**,是一種強烈**。C35H48N8O11S。無色,細針狀結晶。分子量788.87g/mol, 熔點281oC.
0.1mg鬼筆環肽溶于1ml無水甲醇(也可用DMSO或無水乙醇溶解)配成貯存液,可在-20度避光的條件下長期保存,工作液的濃度為5ug/ml,由貯存液加生理鹽水PBS稀釋20倍即可。
生理鹽水PBS清洗細胞2次,每次10分鐘;
3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分鐘,生理鹽水PBS清洗細胞2次;
加入5ug/ml的FITC-鬼筆環肽室溫染色30-60分鐘,夏季時間可以短一些,生理鹽水PBS清洗細胞2次;
DAPI或hoechst33258染細胞核10分鐘,生理鹽水PBS清洗細胞2次;
吸去多余水分,加熒光封片液(中性或偏堿性緩沖液加等量甘油),蓋上蓋玻片,熒光或共聚焦顯微鏡下觀察。
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